乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备

作者：华荣虹; 王斌; 陈娜莎; 于海; 刘天强; 马红; 刘娣; 童光志

来源：中国兽医科学, 2008, (02): 133-136.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4696.2008.02.010

• 乙型脑炎病毒
• E蛋白
• 单克隆抗体
• 表位

为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BamHⅠ与XhoⅠ之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒。该表位融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选。结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定。经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为κ链。结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 黑龙江省农业科学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北林业大学