干扰TBL1XR1表达调控c-Met/PI3K/Akt通路对胰腺癌细胞生物学行为影响的实验研究

作者：张银鹏; 孙金兵; 宗洋; 陆晓雷; 符炜; 顾剑峰^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2021, 26(02): 97-103.

• 胰腺癌
• TBL1XR1
• c-Met/PI3K/Akt通路
• 增殖
• EMT

目的探讨干扰TBL1XR1表达对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响,及其可能分子机制。方法体外培养胰腺癌细胞As PC-1,分为空白对照组、阴性对照组(转染scramble shRNA),si-TBL1XR1组(转染TBL1XR1 shRNA),AMG-458组(加入c-Met抑制剂AMG-458)和si-TBL1XR1+HGF组(在TBL1XR1 shRNA转染细胞中加入cMet激活剂HGF)。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测各组TBL1XR1相对表达量。采用CCK-8法、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭的活性。细胞免疫荧光法检测细胞EMT表型。Western blotting法检测c-Met/PI3K/Akt信号通路和EMT相关蛋白的表达。结果 GEPIA在线分析结果显示,胰腺癌组织中TBL1XR1表达水平高于正常组织; TBL1XR1低表达组OS优于高表达组。H6C7细胞中TBL1XR1相对表达量为1.00±0.05,低于胰腺癌As PC-1、Capan-1、PANC-1、CFPAC-1、Bx PC-3细胞(1.85±0.08、1.08±0.05、1.36±0.10、1.28±0.08、1.60±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,siTBL1XR1组和AMG-458组中细胞增殖、迁移、侵袭活性降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白比值和c-Met蛋白、Vimentin蛋白表达均下调,E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05)。与si-TBL1XR1组比较,si-TBL1XR1+HGF组细胞增殖、迁移、侵袭活性则被逆转,同时p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白比值和c-Met蛋白、Vimentin蛋白表达上调,且E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05)。结论干扰TBL1XR1表达可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭活性,其机制是与抑制c-Met/PI3K/Akt信号通路以及阻止EMT表型转化有关。

• 单位
  苏州大学