摘要
为探究核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)基因在马氏珠母贝Pinctada fucata martensii中的作用,克隆获得了马氏珠母贝Nrf2基因的完整CDS区,分析了其序列特征,并运用实时荧光定量PCR分析Nrf2在不同组织、不同免疫刺激和营养条件下的表达模式。结果表明:马氏珠母贝Nrf2基因开放阅读框为2 652 bp,编码883个氨基酸,预测该蛋白的相对分子质量为100 150,Nrf2蛋白靠近C端处具有一个BRLZ结构域;系统进化分析显示,马氏珠母贝Nrf2氨基酸序列与长牡蛎Crassostrea gigas等双壳贝类聚为一支,亲缘关系较近;荧光定量PCR分析显示,Nrf2基因在马氏珠母贝肠道、足、外套膜、闭壳肌、鳃、肝胰腺、性腺组织中均有表达,其中,肝胰腺、肠道和鳃中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);贝体受到LPS、PGN、Poly I:C刺激后,Nrf2在48 h时显著上调(P<0.05),且表达量最高,分别为0 h PBS对照组的3.8、2.8、3.1倍;以螺旋藻粉、酵母粉和豆粕为主要蛋白源的饲料组中Nrf2基因表达量显著高于小球藻粉和玉米粉组(P<0.05)。研究表明,Nrf2可能参与马氏珠母贝免疫应答过程,这为分析Nrf2的生物学功能及其在机体免疫调节中的作用提供了数据资料。
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