双白莲合剂中对香豆酸的含量测定及其抑制食管癌细胞生长的机制

作者：郑伊琳; 姚笑睿; 辛淑波; 李庆南^*; 黄国鑫^*

来源：西安交通大学学报（医学版）, 2022, 43(06): 918-925.

• 双白莲合剂
• 对香豆酸
• 食管癌
• PI3K/AKT/Bcl-2通路

目的 建立双白莲合剂中主要成分对香豆酸(p-coumaric acid, PCA)的含量测定方法，并探索其抗癌机制。方法 采用高效液相色谱法建立双白莲合剂中PCA的含量测定方法；采用CCK8法检测PCA对食管癌细胞的抗肿瘤活性作用，测定PCA对食管癌细胞的半抑制浓度；采用裸鼠成瘤实验研究PCA的体内抗肿瘤作用；采用Western blotting检测食管癌细胞和裸鼠肿瘤组织凋亡相关蛋白(cleaved caspase 3、cleaved PARP、Bad、Bcl-2、PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT)的表达。结果 双白莲合剂中PCA含量为16.84μg/mL,PCA线性回归方程为y=204 402x+360 904(15～40μg/mL),精密度实验标准偏差(relative standard deviation, RSD)为2.66%,稳定性实验RSD分别为2.35%、3.22%、1.58%、4.08%,重复性实验RSD为4.01%,加样回收率均值为97.83%,RSD值为6.16%。CCK8实验结果显示，PCA在食管癌细胞KYSE30和KYSE140的半数抑制率(IC50)分别为36μg/mL和55μg/mL;裸鼠荷瘤实验结果显示，给药30 d后，空白对照组小鼠的移植瘤体持续增大，而顺铂组(100μg/mL)、PCA组以及PCA联合顺铂给药均可有效抑制荷瘤小鼠移植瘤体的生长。此外，Western blotting结果显示，顺铂、PCA以及PCA联合顺铂均可以有效地提高瘤体组织和KYSE30、KYSE140食管癌细胞中cleaved caspase 3、cleaved PARP以及Bad的蛋白表达含量，同时降低瘤体组织和食管癌细胞中Bcl-2、p-PI3K和p-AKT的蛋白表达。结论 双白莲合剂中主要成分PCA含量为16.84μg/mL,液相色谱含量测定方法条件灵敏稳定；PCA可能通过调节PI3K/AKT/Bcl-2信号通路，诱导食管癌细胞凋亡，从而产生抗肿瘤活性作用。

• 单位
  汕头市中心医院