慢病毒载体介导的IRX1基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

作者：陈晓洁; 郭玲宇; 张萍^*

来源：新医学, 2020, 51(04): 274-279.

• 易洛魁家族同源盒1基因
• 宫颈癌SiHa细胞
• 增殖
• 凋亡

目的观察慢病毒载体介导的易洛魁家族同源盒1(IRX1)基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响。方法培养宫颈癌SiHa细胞并分为3组:其中未做任何处理的SiHa细胞为Control组、转染空载质粒的SiHa细胞为sh-NC组、转染IRX1短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒载体质粒的SiHa细胞为sh-IRX1组。实时定量PCR和蛋白免疫印迹法分别在IRX1 mRNA和蛋白表达水平上鉴定转染效果,CCK-8法和克隆形成试验检测转染后SiHa细胞增殖能力变化,流式细胞术检测转染后SiHa细胞周期和细胞凋亡的变化,蛋白免疫印迹法检测SiHa细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤(BCL)关联X蛋白(BAX)和BCL-2蛋白表达水平。结果与Control组和sh-NC组比较,sh-IRX1组SiHa细胞中IRX1mRNA和蛋白表达水平均下调,SiHa细胞活性和克隆形成能力均降低,G0/G1期细胞比例增多,S期和G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡率升高,细胞中PCNA、Cyclin D1和BCL-2蛋白表达水平下调,BAX蛋白表达水平上调(P均<0.05)。结论慢病毒载体介导IRX1基因沉默可抑制人宫颈癌SiHa细胞增殖,并促进细胞凋亡。

• 单位
  山东大学第二医院