摘要

目的 构建缺失IFN γ受体基因的天坛株重组痘苗病毒载体 ,初步研究其毒力的改变及B8R缺失区插入外源基因表达的稳定性。为研制表达多价抗原重组痘苗病毒载体、提高痘苗病毒载体安全性进行探索。方法 采用PCR技术、多步克隆构建带有天坛株痘苗病毒B8R基因外左右侧同源臂、痘苗病毒启动子序列pE L、p7 5及下游LacZ序列的转移质粒pSKB8R、pSKB8RLacZ。将痘苗病毒VTT与转移质粒pSKB8RLacZ共转染CEF细胞进行同源重组 ,经蓝白斑筛选、连续单斑纯化、鉴定获得B8R基因 (IFN γ受体基因同源序列 )缺失为LacZ所取代的重组病毒VTT△B8RLacZ。结果 经酶切、测序鉴...