摘要
犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)阳性血清在CPV疫苗制品的效力检验、外源病毒检验和鉴别检验中不可或缺,对CPV相关生物制品的质量控制至关重要,为了制备中和抗体效价高、特异性好的CPV阳性血清,试验用CPV DD株免疫健康易感比格犬2只,经4次免疫后采血分离血清,采用微量细胞中和试验法、免疫荧光法和《中国兽药典》三部附录中无菌检验、支原体检验和外源病毒检验法对血清进行鉴定,将该血清应用在犬类疫苗的外源病毒检验和鉴别检验中,建立了CPV间接免疫荧光检测法(IFA)并应用于疫苗的效力检验(病毒含量测定)中。结果表明制备的CPV阳性血清中和抗体效价高达1∶32768,中和指数>106.2,对犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒的中和抗体效价均<1∶4,狂犬病病毒中和抗体效价<0.03 IU/mL。用制备的阳性血清对3种CPV相关活疫苗进行外源病毒检验可完全中和10头份的疫苗毒;对2种CPV相关活疫苗进行鉴别检验,结果符合质量标准规定。利用CPV间接免疫荧光检测法对3种CPV相关活疫苗进行病毒含量测定,结果显示建立的IFA方法对3株疫苗株均有交叉免疫反应,与商品化CPV荧光单抗检测灵敏度差异不大。说明CPV阳性血清中和能力强、特异性好,可用于犬用活疫苗外源病毒检验、鉴别检验和效力检验。
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单位中国兽医药品监察所