枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选

作者：顾林平; 张冰; 费艳; 王化坤; 王鹏凯^*

来源：中国南方果树, 2019, 48(01): 41-46.

DOI：10.13938/j.issn.1007-1431.20180198

• 枇杷
• iPBS分子标记
• 体系优化
• 引物筛选

以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg2+1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到谱带清晰、多态性好的引物22条,可用于枇杷的分子标记分析。

• 单位
  苏州农业职业技术学院