青蒿琥酯体外抗细粒棘球蚴活性氧对DNA作用机制影响的研究

作者：郑海亚; 文丽梅; 吕国栋; 卢帅; 李亚芬; 郑璇; 木扎拜尔·木合地尔; 赵军; 王建华

来源：中国病原生物学杂志, 2017, 12(08): 751-761.

DOI：10.13350/j.cjpb.170812

• 青蒿琥酯
• 细粒棘球蚴
• 活性氧
• 活性氧清除剂
• DNA损伤

目的了解索青蒿琥酯体外抗细粒棘球蚴氧化损伤机制。方法以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照组,H2O2为活性氧(reactive oxygen species,ROS)对照组,阿苯达唑(albendazole,ABZ)和硝唑尼特(nitazoxanide,NTZ)为药效对照组,青蒿琥酯低剂量组(65μmol/L),青蒿琥酯中剂量组(130μmol/L)和青蒿琥酯高剂量组(325μmol/L)为实验组,采用1%伊红染色法检测实验组药物干预4d的细粒棘球蚴死亡率,并观察病理组织学和超微结构变化;采用双氢罗丹明123(DHR123)法检测细粒棘球绦虫细粒棘球蚴体内ROS含量动态变化;采用单细胞凝胶电泳法(彗星实验)以Olive尾距(OTM)作为DNA损伤指标对各组细粒棘球蚴的DNA损伤情况进行分析。同时设活性氧清除剂甘露醇(mannitol,man)与药物联合干预细粒棘球绦虫细粒棘球蚴试验组作比较。结果与甘露醇联合药物干预组比较,青蒿琥酯中剂量组与H2O2组细粒棘球蚴死亡率降低(χ2分别=46.371和59.328,P<0.05);病理学观察青蒿琥酯组细粒棘球蚴顶突小钩脱落,角质层、生发层结构均遭到破坏;透射电镜观察细粒棘球蚴生发层出现大量脂滴,并且有异染色质出现;在330min内,青蒿琥酯低、中和高剂量组细粒棘球蚴ROS含量升高程度均明显高于阿苯达唑组、硝唑尼特组,并具有一定的剂量依赖性;青蒿琥酯高剂量组彗星实验图像拖尾明显,证明细粒棘球蚴DNA受损严重;青蒿琥酯低、中、高剂量组与阿苯达唑组、硝唑尼特组相比,OTM值比较均具有显著性差异(t=9.065、13.134、7.845、9.400、12.251和7.877,P<0.01)。结论青蒿琥酯抗细粒棘球蚴的作用机制可能通过产生ROS导致其DNA损伤所致,为青蒿琥酯抗包虫病作用靶点的筛选和抗包虫病新药的开发奠定了基础。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院