ITFG1与TNFRSF14之间的直接相互作用及其在脑型疟发病过程中的作用

作者：梁姣; 卯云烨; 黄豫晓; 沈燕; 王军; 朱卿昊; 李英辉^*

来源：热带医学杂志, 2020, 20(08): 1001-1024.

• ITFG1
• TNFRSF14
• 脑型疟
• 肿瘤坏死因子α

目的研究T细胞调节蛋白(ITFG1)与干扰素受体超家族成员14(TNFRSF14)之间的直接相互作用,及其在小鼠实验型脑型疟发病过程中对炎症因子表达水平的作用。方法本次实验分别构建了ITFG1胞外段和TNFRSF14胞外段的真核表达载体pcDNA3.1-HisA-ITFG1和pFlag-CMV4-TNFRSF14,共转染293A细胞表达ITFG1-His和TNFRSF14-Flag融合蛋白,通过免疫共沉淀(Co-IP)实验验证ITFG1和TNFRSF14之间的直接相互作用;此外,通过腹腔注射伯氏疟原虫ANKA株(PbANKA)感染C57BL/6小鼠建立脑型疟模型,分别在感染3 d和5 d后,通过Real-Time检测小鼠脑组织和脾脏ITFG1、TNFRSF14和肿瘤坏死因子(TNF-α)的m RNA表达水平,对数据进行Student t检验分析研究其相关性。结果成功构建ITFG1胞外段和TNFRSF14胞外段真核表达载体并成功表达ITFG1-His和TNFRSF14-Flag融合蛋白,通过Co-IP验证ITFG1和TNFRSF14之间存在直接的相互作用,并在脑型疟小鼠感染模型中发现,PbANKA感染5 d后,脑组织持续高表达ITFG1,同时TNFRSF14和TNF-α的mRNA表达水平也明显升高;而在脾脏组织ITFG1表达量明显降低,同时TNFRSF14和TNF-α的mRNA表达水平也明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ITFG1和TNFRSF14之间存在直接的相互作用,而且在脑型疟感染过程中其mRNA表达水平与炎症因子TNF-α的表达量之间存在正相关性,说明ITFG1可能通过TNFRSF14上调脑型疟发病过程中的炎症反应,从而对脑组织造成一定程度的免疫病理损伤。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 基础医学院