基于转录组学的化湿败毒方治疗流感病毒性肺炎作用机制

作者：单中超; 孙建辉; 李建良; 于泽玥; 郝莉雨; 邓玉荣; 霍海如; 李洪梅; 黄璐琦

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(18): 54-61.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230837

• 甲型流感病毒
• 化湿败毒方
• 病毒载量
• 转录组测序
• 差异表达基因

目的：明确化湿败毒方对甲型H1N1流感病毒致小鼠肺炎的治疗作用，基于转录组学探讨其作用机制。方法：采用甲型H1N1流感病毒滴鼻感染建立小鼠流感病毒性肺炎模型，连续给药5 d，考察小鼠一般状况、肺指数、病毒载量、肺组织病理形态、生存时间、生存时间延长率等指标，明确化湿败毒方对流感病毒性肺炎的治疗作用。采用转录组学技术检测模型组与正常组、化湿败毒方组与模型组小鼠肺组织的差异表达基因，筛选化湿败毒方治疗流感病毒性肺炎的潜在核心靶点；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证化湿败毒方对核心靶点基因mRNA表达水平的影响。结果：与正常组比较，模型组小鼠肺指数及肺组织内病毒载量均明显升高（P<0.05,P<0.01）；与模型组比较，化湿败毒方高剂量组明显延长甲型流感病毒感染小鼠的生存时间（P<0.05），明显降低小鼠肺指数值（P<0.05），降低肺组织病毒载量，化湿败毒方高、中、低剂量组可明显减轻小鼠肺组织炎症、瘀血、肿胀等病变（P<0.05,P<0.01）。肺组织转录组学分析显示，化湿败毒方干预后核心基因主要富集在核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、白细胞介素-17(IL-17)信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路，TNF受体相关因子6(TRAF6)、核转录因子-κB抑制因子α(NFKBIA)、趋化因子配体（CCL）2、CCL7、CXC趋化因子配体2(CXCL2)为combinedscore值前5的节点基因；Real-timePCR验证显示，化湿败毒方能明显下调NF-κB信号通路关键基因TRAF6、NFKBIA及趋化因子CCL2、CCL7、CXCL2 mRNA表达（P<0.05,P<0.01）。结论：化湿败毒方对流感病毒性肺炎具有治疗作用，可能通过抑制NF-κB信号通路关键节点TRAF6、NFKBIA表达，抑制趋化因子CCL2、CCL7、CXCL2的表达，减少炎症细胞的募集，降低病毒载量，发挥抗流感病毒肺炎作用。

• 单位
  江西中医药大学; 中国中医科学院; 中国中医科学院中药研究所