小鼠Wnt-1基因真核表达载体构建及其在大鼠成肌细胞中的表达

作者：王秋艳; 杜文娟; 李继科; 杨艳波; 于波

来源：国际病理科学与临床杂志, 2009, 29(03): 196-201.

DOI：10.3969/j.issn.1673-2588.2009.03.003

• Wnt-1
• 载体构建
• 成肌细胞
• 转染

目的:构建p-EGFP-C3-Wnt-1真核表达载体并转染体外培养大鼠成肌细胞,观察Wnt-1在其中的表达。方法:利用RT-PCR方法从小鼠胚脑中扩增获得Wnt-1基因编码区全长序列,克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体p-EGFP-C3上,形成重组载体p-EGFP-C3-Wnt-1。大鼠成肌细胞原代培养及desmin免疫荧光染色鉴定。利用LipofectamineTM2000脂质体将重组质粒p-EGFP-C3-Wnt-1转染成肌细胞。结果:重组质粒p-EGFP-C3-Wnt-1构建成功;将其转染成肌细胞72h后,观察到EGFP报告基因和目的基因Wnt-1表达。结论:成功构建了小鼠胚脑Wnt-1基因的真核表达载体p-EGFP-C3-Wnt-1,并可转染成肌细胞。

• 单位
  哈尔滨市第二医院; 哈尔滨医科大学