表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA腺相关病毒载体的构建和高滴度病毒制备

作者：徐世平; 吴本俨; 王孟薇; 高利利; 伍银桥; 蒋立新; 王卫华; 尤纬缔

来源：世界华人消化杂志, 2007, (12): 1417-1420.

• 胃癌
• GCRG213基因
• 腺相关病毒
• siRNA
• 基因转染 Gastric cancer
• GCRG213 gene
• Adeno-associated virus
• Short interference RNA
• Gene transfection

目的:构建一个表达胃癌相关基因GCRG213小干扰RNA的重组腺相关病毒载体,制备能靶向性抑制GCRG213表达的重组腺相关病毒.方法:将构建好并经验证的包含胃癌相关基因GCRG213特异性小干扰RNA片段GCRG213-RNAi-2的IMG800-GCRG213i-2质粒用Bam H I+Bg/Ⅱ双酶切,回收410 bp左右目的片段,将pSNAV2.0质粒用BamH I单酶切后同目的片段连接,经酶切和测序鉴定后,用新建质粒脂质体转染BHK-21细胞,G418筛选后大规模培养,再用辅助病毒HSV1-rc/△UL2感染,获取病毒.结果:成功构建包含U6启动子和胃癌相关基因GCRG213特异性RN...

• 单位
  本元正阳基因技术有限公司; 解放军总医院