本发明公开了一种用于体内产生CAR-巨噬细胞(CAR-M)的脂质纳米颗粒及其制备方法和应用。所述脂质纳米颗粒包含脂质膜和由所述脂质膜包裹的带有CAR的质粒;所述脂质膜包含DlinMC3、DOPE、Chol、PEG-DMG、DOTAP和DSPE-MTAS-NLS。本发明利用此脂质纳米颗粒在体内直接产生CAR-M细胞,为CAR-M疗法治疗实体瘤提供了一种新颖、便捷、通用的实施方案。