人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab'融合蛋白的构建和表达

作者：姜文国; 熊冬生; 刘芳; 郭红星; 苏晔; 吕晶丽; 杨纯正

来源：生物工程学报, 2008, (03): 376-380.

DOI：10.13345/j.cjb.2008.03.003

• 4-1BBL
• CD20
• 靶向治疗
• 免疫治疗 4-1BB ligand
• targeting therapy
• cancer immunotherapy

研究共刺激分子4-1BBL在肿瘤靶向治疗方面的作用,用PCR和overlap PCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab’融合蛋白表达载体,并用双脱氧终止法测定DNA序列;采用亲和层析法纯化该产物,并用SDS-PAGE和HPLC鉴定纯化产物;采用玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明:人4-1BBL胞外区/抗CD20Fab’融合蛋白已构建成功。表达可溶性产物的产量达200μg/L以上,纯度较高,具有与激活的Jurkat(4-1BBL+)和Raji细胞(CD20+)结合的活性。这将为非何杰金氏淋巴瘤免疫治疗、靶向治疗提供新的思路。

• 单位
  实验血液学国家重点实验室; 中国医学科学院血液学研究所; 滨州医学院