利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA

作者：韦德芳; 高健; 曾春华; 彭明利; 任红

来源：生物技术通报, 2010, (11): 146-152.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.11.015

• pSOS
• 乙肝病毒
• X基因
• RNA干扰 pSOS Hepatitis B virus X gene RNA interference

构建靶向乙肝病毒(HBV)X基因的真核表达载体pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA,转染肝癌细胞系HepG2和HepG2.2.15,筛选和验证高效siRNA。设计4个靶向X基因siRNA,将siRNA和HBx基因插入载体pSOS得重组质粒pSOS-X-siRNA;pSOS-X-siRNA经PacI酶切去除目的片段HBx后得pSOS-siRNA。将质粒pSOS-X-siRNA和pSOS-siRNA分别转HepG2和HepG2.2.15肝癌细胞株。荧光显微镜下观察HepG2细胞绿色荧光(GFP)减弱程度预估干扰效率。ELISA检测HepG2.2.15细胞上清HBsAg、HBeAg表达,W...

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第二医院