猪流行性腹泻病毒S蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

作者：柏家果; 刘思雨; 杜琛; 陆颖; 黄诗婷; 余科辰; 何贵府; 陈樱; 韦祖樟; 黄伟坚; 欧阳康^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(11): 1415-1421.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0184

• 猪流行性腹泻
• S蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为深入研究猪流行性腹泻病毒（PEDV）的结构和功能及建立PEDV的血清学检测方法，运用基因克隆技术将目的基因克隆至表达载体pET-30a （+）中，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21 (DE3)进行诱导表达，表达产物纯化后免疫新西兰大白兔获得抗S蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE试验结果显示，成功表达大小为14.2 ku和47.5 ku的目的重组蛋白，Western-blot试验显示目的条带与预期相符且条带单一。对获得的多克隆抗体进行Western-blot和间接免疫荧光验证的结果显示，PVDF膜上的条带与预期条带一致且感染PEDV的Vero细胞内出现特异性绿色荧光信号。结论，本研究通过表达纯化PEDV S蛋白，成功制备具有良好免疫原性的家兔多克隆抗体，为深入研究PEDV的结构和功能奠定了基础，为PEDV的血清学检测方法的建立提供了生物学材料。

• 单位
  广西大学