胚胎干细胞定向分化为脊髓运动神经元

作者：邢变枝; 陈红; 钱坤; 湛彦强; 张苏明

来源：华中科技大学学报(医学版), 2009, (01): 94-97.

• 胚胎干细胞
• 细胞分化
• 音猬酸
• 维甲酸
• 运动神经元

目的探讨胚胎干细胞(ESC)分化为运动神经元的方法。方法用含重组人白血病抑制因子(LIF,1 000 U/μl)的培养液培养胚胎干细胞,第3天,悬滴法培养拟胚体(embryoid body,EB),第5天添加音猬酸(sonic hedgehog,Shh,5 nmol/L)和维甲酸(RA,1μmol/L),再培养5 d;然后将EB贴于铺有基质胶(matrigel)的培养皿上。采用免疫细胞荧光及流式细胞术检测运动神经元的分化。结果胚胎干细胞可以在LIF存在条件下撤去饲养层细胞,并保持未分化状态,碱性磷酸酶和OCT-4检测阳性。Shh和RA处理后5 d,胚胎干细胞可以分化为运动神经元,运动神经元核转录因子HB-9阳性:未经Shh和RA处理的胚胎干细胞几乎没有HB-9阳性细胞。流式细胞检测(36.09±8.68)%EB细胞HB-9阳性表达。结论胚胎干细胞在特殊的细胞因子作用下可以定向分化为特定的神经元;该培养方案可以定向分化胚胎干细胞为运动神经元。

• 单位
  武汉大学人民医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院