摘要
目的探讨微小RNA-21(miR-21)在小鼠神经细胞缺氧缺血损伤中的作用及其机制。方法将培养好的小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a细胞随机分为五组,采用Lipo2000脂质体转染法将20、40、60 nmol/L miR-21 mimics分别转染入20、40、60 nmol/L转染组,将mimic-control转染至阴性对照组,空白对照组未转染。60 nmol/L转染组、阴性对照组和空白对照组采用氧糖剥夺再灌注法建立神经细胞缺血再灌注损伤模型,用TUNEL染色法测算细胞凋亡指数,用实时荧光定量PCR法检测细胞内miR-21及p53 mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内p53蛋白表达。结果与空白对照组、阴性对照组相比,转染组miR-21相对表达量高(P均<0. 05),且60 nmol/L转染组miR-21相对表达量最高(P均<0. 05),证明成功将miR-21转染至N2a细胞内。60 nmol/L转染组凋亡指数低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 05)。60 nmol/L转染组p53表达低于阴性对照组、空白对照组(P均<0. 05)。结论 miR-21对缺氧缺血损伤的神经细胞有保护作用,该作用可能与其负调控N2a细胞中p53表达有关。
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单位武汉大学人民医院