YKL-40调控子宫内膜癌顺铂化疗耐药性的实验研究

作者：程春来; 丁雯; 车元^*

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(02): 113-118.

• 子宫内膜癌
• YKL-40
• 顺铂
• 耐药性

目的探讨沉默甲壳质酶蛋白40(YKL-40)表达对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP的影响。方法采用DDP长期浓度梯度递增法体外建立Ishikawa/DDP耐药细胞株,并检测多药耐药相关基因(MDR1)和Bcl-2、Bax和caspase-3的表达,采用MTT法检测Ishikawa细胞和Ishikawa/DDP细胞的增殖活性,计算半数抑制浓度(IC50)。Ishikawa/DDP分别转染NC阴性序列(NC组)和siRNA YKL-40(si-YKL-40组),另设未转染细胞作为对照组,采用MTT法、划痕实验和Annexin V/PE双染法检测DDP对si-YKL-40组Ishikawa/DDP细胞增殖、迁移能力和凋亡的影响。结果体外成功建立Ishikawa/DDP耐药细胞株,3. 125、6. 25、12. 5、25、50、100μmol/L DDP对Ishikawa/DDP细胞的增殖抑制率分别为(6. 93±2. 45)%、(8. 14±4. 50)%、(11. 37±4. 62)%、(15. 18±3. 97)%、(26. 29±5. 08)%、(41. 32±7. 64)%,明显低于Ishikawa细胞(P<0. 05)。DDP对Ishikawa和Ishikawa/DDP的IC50分别为14. 58μmol/L和116. 70μmol/L,Ishikawa/DDP的耐药指数为8. 004。QPCR检测结果显示,Ishikawa细胞YKL-40、MDR1、Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA表达量分别为0. 82±0. 15、0. 43±0. 11、1. 05±0. 23、1. 17±0. 20、0. 96±0. 18,而Ishikawa/DDP细胞分别为1. 87±0. 40、2. 34±0. 46、1. 52±0. 28、0. 72±0. 21、0. 49±0. 17,差异有统计学意义(P <0. 05)。3. 125、6. 25、12. 5、25、50、100μmol/L DDP对si-YKL-40组细胞的增殖抑制率分别为(10. 95±2. 74)%、(18. 73±5. 30)%、(32. 79±5. 47)%、(52. 28±6. 58)%、(61. 73±5. 26)%、(65. 45±7. 33)%,明显高于对照组和NC组,差异有统计学意义(P<0. 05)。DDP对si-YKL-40组细胞的IC50为22. 19μmol/L。与对照组和NC组比较,si-YKL-40组细胞凋亡率升高、愈合率下降; YKL-40、MDR1、Bcl-2蛋白表达量下调,Bax和caspase-3蛋白表达量上调,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论沉默YKL-40可显著提高Ishikawa/DDP细胞株对DDP的敏感性,并促进细胞凋亡,其具体机制可能与下调MDR1、Bcl-2表达,及上调Bax和caspase-3表达有关。

• 单位
  长江航运总医院