摘要
目的 分析1株副溶血性弧菌噬菌体474x1的生物学特性、全基因组及在食品中的抑菌效果。方法以副溶血性弧菌474菌株为宿主菌,从海鲜市场基围虾分离噬菌体474x1,利用投射电镜观察其形态,并绘制一步生长曲线,分析474x1对温度及pH的敏感性。分析474x1全基因组序列,根据474x1末端酶大亚基构建系统进化树。通过测定菌落总数评价噬菌体对虾肉中副溶血弧菌的抑制效果。结果分离到1株新型的副溶血弧菌噬菌体,命名为474x1,该噬菌体能够裂解23株副溶血弧菌中的19株(19/23=82.61%)。电镜观察474x1具有典型的短尾病毒科病毒形态特征。最佳感染复数(MOI)为0.01,一步生长曲线显示474x1的潜伏期为10min,裂解量为115PFU/cell。该噬菌体能够在较大的温度范围(30-60 ℃)和pH(4-11)范围内维持活性。474x1全基因组长47830bp,包含69个开放阅读框(ORFs),其中14个具有特定功能的基因。比较基因组学分析474x1与短尾噬菌体科弧菌属噬菌体Vp41s3基因组具有较高同源性,进化分析表明474x1与副溶血弧菌噬菌体Vp41s3亲缘性最高。在应用实验中,在4℃下MOI=1000的实验组在第3h相较对照组菌量下降了0.39lgCFU/mL。MOI=10000的实验组在第12h相较对照组菌量下降了0.92lgCFU/mL,在25℃下MOI=1000,MOI=10000的实验组相较对照组在第6h时菌量分别下降1.04lgCFU/mL、1.82lgCFU/mL,表明噬菌体474x1能够显著抑制虾肉中宿主菌的生长。结论从基围虾中分离鉴定1株新的副溶血性弧菌噬菌体,该噬菌体裂解量大,潜伏期短,在60 ℃以下表现出较好的稳定性,能耐受宽范围的pH,在食品中也有良好的抑菌效果,为防控水产品副溶血性弧菌的致病株奠定了基础。
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