人F3-GRIM19基因的克隆与表达

作者：孙厚良; 刘洋; 李甲初; 曾昭淳

来源：世界华人消化杂志, 2005, 13(19): 2306-2309.

DOI：10.3969/j.issn.1009-3079.2005.19.005

• GRIM19基因
• 克隆
• 表达
• 纯化

目的:克隆GRIM19基因,并构建F3-GRIM19表达载体.方法:从正常人胎盘组织中克隆GRIM19的cDNA,并构建了F3-GRIM19表达载体,测序正确后,表达并亲和层析纯化F3-GRIM19融合蛋白.结果:克隆后测序,发现其含有约580 bp的插入片段,基因与GenBank序列完全一致,读码框正确.在大肠杆菌中表达Mr 25 000的F3-GRIM19蛋白,灰度值分析表达量约占菌体总蛋白的25%.经纯化,目的蛋白纯度达90%,复性率为17.3%.结论:成功构建了F3-GRIM19原核表达载体,并成功表达纯化了目的蛋白.

• 单位
  重庆医科大学