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摘要
以经典毒株C株的基因组为模板，测序后对NS3蛋白的二级结构进行分析，并对抗原表位进行预测，结果表明NS3的二级结构非常丰富并且存在丰富的B细胞抗原表位和T细胞抗原表位。截获3个不同的基因区域a、b和c,并设计相应的引物，分别扩增出约645、609和615 bp的靶基因，分别用pET-28a表达载体进行重组后，获得pET-28a-NS3a、pET-28a-NS3b与pET-28a-NS3c,用表达菌株BL21(DE3)进行表达，b段表达较高，可溶性表达较好，纯化后，可获得重组蛋白CSFV-His-NS3b, SDS-PAGE验证表达的重组蛋白大小约为27 kD,Western-Blot证实其具有良好的免疫原性，并且通过ELISA测得蛋白浓度约5 mg/mL,表明该蛋白特异性很强，可用于猪瘟诊断试剂盒的开发应用。
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单位扬州优邦生物药品有限公司
