程序性细胞死亡因子4基因对川崎病血清诱导血管内皮细胞凋亡的影响

作者：孙真真; 温航卫; 陶凤姣; 游亚兰; 彭新平^*

来源：安徽医药, 2020, 24(07): 1366-1370.

• 黏膜皮肤淋巴结综合征/免疫学
• 细胞凋亡
• 基因,肿瘤抑制
• 内皮,血管
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶6
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9
• 程序性细胞死亡因子4(PDCD4)

目的研究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对川崎病病人血清诱导的血管内皮细胞凋亡的作用。方法研究时间为2017年3月至2018年4月。采集邵阳学院附属第一医院川崎病病人血清,处理血管内皮细胞,实时荧光定量PCR(realtime PCR)和蛋白质印迹法检测细胞中PDCD4 mRNA和蛋白表达水平。在血管内皮细胞中转染PDCD4 siRNA,用川崎病血清培养,以Realtime PCR和蛋白质印迹法检测细胞中PDCD4表达水平。MTT方法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(C-Caspase-3)、活化型Caspase-9(C-Caspase-9)蛋白水平。结果川崎病病人血清处理后的血管内皮细胞中PDCD4表达上调[mRNA:(1.00±0.01)比(3.51±0.36);蛋白:(0.26±0.08)比(0.57±0.06)]。PDCD4 siRNA可以下调川崎病病人血清诱导的血管内皮细胞中PDCD4表达水平[mRNA:(0.91±0.09)比(0.41±0.06);蛋白:(0.65±0.08)比(0.30±0.05)]。川崎病病人血清处理后的血管内皮细胞增殖能力降低[(100.00±0.00)%比(72.01±7.32)%],细胞凋亡率升高[(6.32±0.58)%比(21.26±2.31)%],细胞中的C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白水平升高。下调PDCD4可以提高川崎病血清条件下血管内皮细胞增殖能力[(71.57±9.05)%比(89.52±6.80)%],减少细胞凋亡[(22.58±1.79)%比(16.47±1.24)%]和细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达。结论下调PDCD4减少川崎病病人血清诱导的血管内皮细胞凋亡。

• 单位
  邵阳学院附属第一医院; 湖南省人民医院