摘要
目的探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂预处理对高糖培养下缺氧/复氧引起心肌细胞损伤的影响及机制。方法将离体培养的H9C2心肌细胞分为正常葡萄糖(5 mmol/L,N组)、高糖(25 mmol/L,G组)、高糖+利拉鲁肽预处理(100 nmol/L,L组)、高糖+利拉鲁肽+wortmannin预处理(20 nmol/L,W组)4组。H9C2细胞行缺氧/复氧处理。TUNEL法检测细胞凋亡,酶法测定细胞培养液一氧化氮合酶(eNOS)、一氧化氮(NO)及活性氧(ROS)水平,免疫印迹法测定磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-P13K)、磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、Bcl-2及caspase-3蛋白表达。结果缺氧/复氧后,G组心肌细胞凋亡率高于N组[(15.79±3.92)%比(9.74±1.14)%,P=0.028],ROS水平也高于N组[(489.63±21.01)U/ml比(338.50±43.60)U/ml,P<0.001];caspase-3表达G组高于N组(1.87±0.03比1.15±0.04,P<0.001),而Bcl-2水平G组低于N组(1.79±0.06比1.88±0.03,P=0.047);L组的凋亡率、ROS水平、caspase-3表达均低于G组,Bcl-2水平高于G组,且与G组比较,L组p-P13K/P13K(0.87±0.07比0.59±0.09,P=0.002)、p-Akt/Akt(0.34±0.01比0.08±-0.01,P<0.001)、eNOS[(41.29±0.56)ompl/L比(37.20±0.52).μmpl/L,P<0.001]、NO[(31.24±0.40)pmpl/1比(26.66±0.53)μmpl/L,P<0.001]水平明显升高;与L组比较,W组p-P13K/P13K、p-Akt/Akt、eNOS、NO及Bcl-2水平明显下降,细胞凋亡率及caspase-3水平显著升高。结论 GLP-1受体激动剂利拉鲁肽可通过减少ROS产生、激活P13KAkt-eNOS-NO信号通路、抑制细胞凋亡,减轻高糖环境下缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。
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