不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析

作者：单云峰; 宋红焕; 李国莉; 邵燕; 陈诚; 竺丽梅; 李燕^*

来源：实用老年医学, 2019, 33(01): 20-24.

• 骨髓间充质干细胞
• 不同代次
• Wnt/β-catenin信号通路
• 成纤维分化

目的观察不同代次大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖能力及其纤维分化倾向,为临床治疗及组织工程种子细胞的选择提供依据。方法采用贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记; MTT法检测不同代次MSCs的增殖情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测MSCs Wnt通路相关蛋白的表达情况;实时聚合酶链式反应(Realtime-PCR)法检测不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达。结果流式细胞术鉴定结果证实我们培养的大鼠MSCs符合间充质干细胞的特征,且纯度高; MTT法检测显示P3代之后细胞的增殖能力明显高于P1、P2代,Western Blot检测显示细胞内Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达随培养代次增强,Realtime-PCR法检测结果证实P9代细胞开始出现成纤维分化倾向。结论 MSCs作为种子细胞不宜超过P9代,P3～P7代具有纯度高、倍增快等优点,是能够满足组织工程细胞植入的种子细胞。

• 单位
  江苏省疾病预防控制中心