摘要
目的 探讨去甲斑蝥素(norcantharidin, NCTD)诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及其作用机制。方法 倒置显微镜下观察药物作用后的HeLa细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用RT-PCR技术检测HSP90和Akt的mRNA表达水平;采用免疫印迹法检测HSP90和Akt的蛋白表达水平。结果 60μmol/L NCTD作用后对HeLa细胞有细胞毒性,诱导细胞凋亡及抑制HSP90和Akt的mRNA表达和蛋白的活化。20μmol/L的IGF-1R的抑制剂AG1024和60μmol/L NCTD联合应用后细胞皱缩、变圆,出芽形成凋亡小体,显著促进NCTD对HeLa的细胞毒性作用,升高NCTD诱导的细胞凋亡率并进一步抑制了HSP90和Akt蛋白的活化。5 mmol/L超氧阴离子清除剂超氧化物歧化酶(SOD)预处理HeLa细胞后再联合AG1024和NCTD作用后,显著降低AG1024和NCTD诱导的细胞毒性作用和凋亡率,增强HSP90和Akt蛋白的活化。结论 NCTD可以增加超氧阴离子的产生调控Akt信号通路诱导HeLa细胞凋亡。
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