非洲猪瘟病毒H240R蛋白单克隆抗体的筛选与鉴定

作者：张宁; 丁培阳; 任东娜; 陈艺兰; 李雪洋; 常泽杰; 李青梅; 张改平^*

来源：动物医学进展, 2022, 43(08): 1-6.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2022.08.010

• 非洲猪瘟病毒
• H240R蛋白
• 单克隆抗体

为制备抗非洲猪瘟病毒(ASFV)H240R蛋白单克隆抗体，首先构建原核表达质粒pET-29b-H240R,再进行蛋白表达与纯化，随后免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤细胞技术制备、间接ELISA方法筛选获得单克隆抗体。结果显示，共获得4株杂交瘤细胞株，腹水效价均高于1∶40 000;亚型鉴定结果显示，3株单克隆抗体(12D6、21G3、8G7)重链亚类为IgG2b, 13D2重链亚类为IgG1,轻链亚类均为k。Western blot和Dot blot鉴定结果表明，21G3、13D2株单克隆抗体识别的抗原表位为线性表位，而12D6和8G7识别的是构象表位。间接免疫荧光试验(IFA)结果显示，4株单克隆抗体均能特异性识别HEK293T细胞中表达的H240R蛋白。制备了ASFV H240R蛋白单克隆抗体，为H240R蛋白的表位和功能研究奠定了基础。

• 单位
  河南农业大学; 生命科学学院; 西北农林科技大学; 郑州大学; 河南省农业科学院