糖尿病肾病大鼠TGF-β1调控SREBP1活化的作用

作者：王耀坤; 张尚衡; 杨克科; 马小茹; 王淑秋; 王淑湘; 陈光; 王芳芳^*

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(12): 3040-3044.

• 糖尿病肾病
• 转化生长因子(TGF)-β1
• 胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1

目的 探讨糖尿病肾病(DKD)大鼠转化生子因子(TGF)-β1调控胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1活化的作用。方法 TGF-β1 (2 ng/ml)和(或)SCAP抑制剂(Fatostatin)、S1P抑制剂(AEBSF)、PI3K抑制剂(LY294002,Wortmainin)、Akt抑制剂(Akt inhibitorⅧ)、mTOR抑制剂(rapamycin)、TβR1抑制剂(SB431542)处理培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC),免疫荧光和Western印迹检测SREBP1的核移位和蛋白表达水平；Western印迹检测FN和CTGF蛋白表达；p3TP-Lux荧光素酶报告质粒和pCMV-β-gal或SREBP1 siRNA转染至MC或Smad3 WT/KO MC,TGF-β1处理24 h后检测p3TP-Lux荧光素酶活性。结果 与AdLacZ组大鼠肾组织中SREBP1蛋白水平相比，AdTGF-β1组明显增加(P<0.05)。与Con组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比，TGF-β1组明显增加(P<0.05),与TGF-β1组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比，T+fato组明显降低(P<0.05)。与Con组mSREBP1蛋白表达相比，TGF-β1组明显升高(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1蛋白表达相比，T+fato组和T+AEBSF组均明显降低(P<0.01)。与Con组GFP荧光强度相比，TGF-β1组明显增加(P<0.05)。与TGF-β1组GFP荧光强度相比，T+fato组明显降低(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1表达相比，T+LY组、T+Wort组、T+Akti组和T+rapa组均明显降低(均P<0.05)。与TGF-β1组相比，T+RIinh组明显抑制了mSREBP1蛋白的表达(P<0.01)。与ConB组mSREBP1表达相比，TGF-β1B组明显升高。ConB组Smad3 KO MC的p3TPLux荧光素酶活性与TGF-β1B组有显著差异(P<0.05)。TGF-β1A组和TGF-β1B组mSREBP1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。与ConB组p3TP-Lux荧光素酶活性相比，TGF-β1D组明显增加(P<0.01);与TGF-β1D组p3TP-Lux荧光素酶活性相比，T+fatoA组明显抑制(P<0.01)。TGF-β1 E组p3TP-Lux荧光素酶活性明显高于TGF-β1 F组(P<0.05)。与ConD组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比，TGF-β1D组均明显升高(P<0.05);与TGF-β1D组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比，T+fatoA组则明显降低(P<0.05)。结论 TGF-β1诱导SREBP1活化引起MC的脂质沉积是DKD发生的重要原因。然而TGF-β1活化SREBP1的作用机制则与SCAP/S1P、PI3K/Akt和TβR1密切相关。然而，TGF-β1的促纤维化作用又依赖SREBP1的活化诱导脂质沉积。因此SREBP1是防治DKD的新靶点。

• 单位
  佳木斯大学; 黑龙江中医药大学; 台州学院