小反刍兽疫病毒N蛋白的原核表达及其生物信息学分析

作者：苗书魁; 任方; 汪萍; 米晓云; 陆桂丽; 魏玉荣; 魏婕; 马文戈; 王延; 黄炯

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(08): 806-810.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.001840

• 小反刍兽疫病毒
• N蛋白
• 原核表达
• 生物信息学分析

目的原核表达小反刍兽疫病毒(peste-des-petits ruminants virus,PPRV)N基因,评价其抗原性,并进行生物信息学分析。方法参照GenBank中登录的PPRV(Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),IPTG诱导N基因原核表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析。运用Expasy Protparam和SOPMA软件对PPRV N基因编码的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果成功表达了PPRV N基因,其融合蛋白相对分子质量约64 400,主要以包涵体形式存在,并可被PPRV羊免疫血清特异性识别。PPRV N蛋白含524个氨基酸,相对分子质量约57 900,亲水性氨基酸占57.63%,疏水性氨基酸占42.17%,碱性氨基酸占12.21%,酸性氨基酸占14.12%,等电点理论值为5.11;亲水性平均系数为-0.296,不稳定系数为48.20;二级结构存在242个α螺旋(占46.18%),42个β转角(占8.02%),164个无规则卷曲(占31.3%),76个延伸链(占14.50%)。结论原核表达的PPRV N蛋白具有良好的特异性和抗原性,为单克隆抗体的制备及快速诊断方法的建立提供了参考。

• 单位
  天康生物股份有限公司; 新疆畜牧科学院; 新疆畜牧科学院兽医研究所