七叶皂苷钠可通过上调水通道蛋白-4的表达抑制脂多糖诱导的血管内皮炎症损伤

作者：李孟垚; 费瑞; 韩冬梅; 戚少龙; 王欣宇; 李伟业; 杜建时^*

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(12).

• 七叶皂苷钠
• 水通道蛋白4
• 血管内皮细胞
• 炎症

目的探讨七叶皂苷钠(SA)对脂多糖(LPS)诱导的血管内皮损伤致炎症作用及机制。方法 IMDM培养基(含10%胎牛血清)体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC), 用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测0.4、1.6和6.4 μg/ml的SA对HUVEC的毒性, 采用2.5 μg/ml和作用时间为6 h的LPS构建炎症损伤细胞模型。实验分组为空白组、模型组(2.5 μg/ml LPS)、低剂量组(2.5 μg/ml LPS+0.4 μg/ml SA)、中剂量组(2.5 μg/ml LPS+1.6 μg/ml SA)和高剂量组(2.5 μg/ml LPS+6.4 μg/ml SA)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞白细胞介素(IL)-6的表达水平;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞中水通道蛋白-4(AQP4)的mRNA表达量;蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测各组细胞中AQP4蛋白表达量。两组间比较采用非成对t检验, 多组间比较采用单因素方差分析。结果 CCK-8检测结果表明, 0.4、1.6和6.4 μg/ml的SA作用6 h后的细胞活性百分数与空白组比较, 差异无统计学意义(91.867±3.758、93.695±4.638、95.838±5.558比100.000±0.000, F=2.946, P>0.05)。IL-6的ELISA检测结果显示, 低、中、高剂量组中IL-6的相对表达量均低于模型组(1.224±0.017、1.119±0.155和1.009±0.012比1.281±0.075, F=5.673, P<0.05);RT-qPCR结果显示, 低、中、高剂量组中AQP4 mRNA的相对表达量均高于模型组(0.770±0.013、0.854±0.014和0.895±0.014比0.713±0.015, F=102.237, P<0.01);Western blot结果显示, 低、中、高剂量组中AQP4蛋白相对表达量均高于模型组(0.758±0.084、0.774±0.079和0.925±0.033比0.668±0.132, F=4.283, P<0.05)。结论 SA能抑制LPS诱导的HUVEC损伤及炎性因子表达, 其机制很可能与上调细胞内AQP4表达有关。

• 单位
  吉林大学; 吉林大学中日联谊医院; 基础医学院