多重荧光定量PCR快速鉴定转基因玉米品系

作者：王凤军; 杨伊平; 叶素丹; 金浩然; 陈强

来源：中国粮油学报, 2023, 38(04): 143-149.

DOI：10.20048/j.cnki.issn.1003-0174.000287

• 转基因
• 玉米品系
• 多重荧光定量PCR
• 快速鉴定

采用多重实时荧光PCR技术的高通量特征，对转基因玉米MIR604、GA21、DAS-40278-9和98140的特异性靶标序列设计TaqMan-MGB荧光探针，通过退火温度和引物探针浓度梯度优化建立了四重实时荧光PCR检测方法，经特异性，重复性和灵敏性等方法学验证确认了方法的可靠性。MIR604、GA21、DAS-40278-9、98140 4个特异性基因的标准曲线回归方程分别为y=-3.263x+36.632,y=-3.422x+36.384,y=-3.294x+38.978和y=-3.278x+37.514;Ct值变化范围分别在23.556～37.524、22.893～37.412、25.304～39.110和24.501～37.618之间；标准偏差分别在0.078～0.476,0.085～0.463,0.120～0.487和0.148～0.353之间；相关系数R2分别为0.997,0.996,0.995和0.993;检出限可达10个拷贝，扩增效率满足欧盟等国际要求。

• 单位
  浙江经贸职业技术学院