丙型肝炎病毒(HCV)截短型E2的原核表达和蛋白纯化

作者：姚敏; 方海亮; 尹文; 雷迎峰; 杨敬; 孙梦宁; 田江红; 吕欣

来源：科学技术与工程, 2009, (09): 2296-2298+2303.

• 丙型肝炎病毒
• 包膜糖蛋白E2
• 原核表达

对丙型肝炎病毒(HCV)截短型包膜糖蛋白E2-661基因进行原核表达和纯化。利用PCR法扩增出661bp的截短型HCVE2区基因片段,并将测序正确的E2-661基因克隆入原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定。结果表明目的蛋白分子量约为35kDa,主要以包涵体形式大量存在。Western-blot结果显示目的蛋白与抗His标签单抗及HCV阳性血清均具有良好的反应原性。并通过镍离子亲和层析方法获得纯化的重组蛋白。以上结果为HCVE2功能的进一步研究奠定了基础。

• 单位
  第四军医大学