肠道病毒71型VP1基因的表达纯化及初步应用

作者：王云龙; 刘元帅; 董彩文; 孙新城; 李玉林; 刘旺根; 昌静峰; 王国强; 张曼莉; 王继创; 秦贵军

来源：广东医学, 2011, (14): 1849-1851.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2011.14.009

• 肠道病毒71
• VP1
• 表达
• 纯化
• 间接ELISA

目的表达纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法。方法通过化学法合成肠道病毒71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21(DE)3,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定。以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA检测方法,并对77份6～10岁无手足口病症状儿童血清及手足口病现症患儿血清进行检测。结果成功构建重组质粒pET-43.1a(+)/VP1,VP1融合蛋白分子量约为43 kD,纯度可达95%;初步建立了人血清中抗EV71...

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 郑州轻工业大学