基于转录组学分析肿节风总黄酮抑制白血病K562细胞生长的作用机制

作者：尚广彬; 柳歌; 孙慧娟; 陈中; 卢晓南; 严小军; 伍庆华^*

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(11): 1445-1452.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.11.001

• 肿节风总黄酮
• 白血病K562细胞
• 转录组学
• MAPK信号通路
• 细胞周期

目的 利用转录组学技术结合体外实验揭示肿节风总黄酮抑制白血病K562细胞生长的作用机制。方法 将K562细胞分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组及肿节风总黄酮低、中、高剂量组(25、50、100μg·mL-1)，干预48 h后采用化学发光法检测K562细胞活力。运用转录组测序(RNA-seq)技术对DMSO对照组和肿节风总黄酮高剂量组(100μg·mL-1)K562细胞进行差异表达基因(DEGs)分析；并对差异表达基因进行基因本体论(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用Western Blot法和流式细胞术验证筛选出的MAPK通路中关键蛋白的表达情况，以及细胞周期变化。结果 与DMSO对照组比较，肿节风总黄酮低、中、高剂量能够显著抑制K562细胞活力(P<0.01)。转录组分析共筛选出989个差异表达基因，其中654个上调、335个下调。KEGG通路富集分析显示，肿节风总黄酮对K562细胞的作用与MAPK信号通路、神经活性配体-受体相互作用、补体和凝血级联途径高度相关。与DMSO对照组比较，高剂量肿节风总黄酮能够显著降低K562细胞的p-JNK、CDC20蛋白表达水平(P<0.01)，升高P53、CDKN1A蛋白表达水平(P<0.01)，明显阻滞K562细胞在G0/G1期(P<0.01)。结论 肿节风总黄酮可能通过降低MAPK信号通路中JNK蛋白磷酸化水平，上调P53、CDKN1A蛋白表达，下调CDC20蛋白表达，阻滞细胞周期，进而抑制白血病K562细胞的生长活性。

• 单位
  江西省中医病因生物学重点实验室; 江西中医药大学