小鼠FOXP3-siRNA慢病毒载体的构建及其对小鼠动脉粥样硬化的影响

作者：王治校; 李小林; 林静; 周运锋; 王磊; 李大主

来源：临床心血管病杂志, 2009, 25(02): 149-151.

DOI：10.3969/j.issn.1001-1439.2009.02.023

• 动脉粥样硬化
• FOXP3基因
• RNA干扰
• 慢病毒载体
• 调节性T细胞

目的:构建小鼠FOXP3基因特异性si RNA慢病毒载体,并对其进行功能性研究。方法:根据Gene-Bank提供的小鼠FOXP3cDNA序列,设计4条RNA干扰靶点序列,制备双链DNA oligo,与制备好的双酶切慢病毒载体连接,再转入细菌感受态细胞DH-5a,行PCR鉴定出阳性克隆并测序,制备成FOXP3-si RNA慢病毒载体,利用Western-blot方法对构建的载体进行功能性研究;将载体通过尾静脉注入小鼠体内,观察其对小鼠动脉粥样硬化形成的影响。结果:构建的小鼠FOXP3基因si RNA慢病毒载体,经PCR和DNA测序证实与设计完全一致,并对Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞有显著敲减效应;其能显著促进动脉粥样硬化形成。结论:体内外实验表明,成功构建了小鼠FOXP3基因的特异性si RNA慢病毒载体。

• 单位
  华中科技大学; 郧阳医学院; 十堰市太和医院; 协和医院