七方胃痛颗粒对过表达14-3-3ζ人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化的抑制作用及机制研究

作者：郑日辉; 陈国忠^*; 袁铁超; 杨昕; 谢彩杏; 陈小霞; 梁毅锋

来源：现代中西医结合杂志, 2022, 31(05): 596-602+607.

• 胃癌
• 七方胃痛颗粒
• 迁移
• 侵袭
• 14-3-3ζ蛋白
• TGF-β/Smad信号通路
• 上皮间质转化

目的 研究七方胃痛颗粒对过表达14-3-3ζ人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化的抑制作用及相关机制。方法 取体外培养的人胃腺癌AGS细胞，经转化生长因子β1(TGF-β_1)诱导发生上皮间质转化后进行实验。实验分为6组：空白EMT组(正常DMEM培养基培养)、14-3-3ζ过表达组(慢病毒转染过表达的EMT细胞加正常DMEM培养基培养)、TGF-β/Smad通路抑制剂组(培养基中加入LY2109761抑制剂培养)、中药血清组(加10%七方胃痛颗粒含药血清培养)、14-3-3ζ过表达TGF-β/Smad通路抑制剂组(慢病毒过表达EMT细胞加LY2109761抑制剂培养)、14-3-3ζ过表达中药血清组(慢病毒过表达EMT细胞加10%七方胃痛颗粒含药血清培养)。镜下观察各组细胞的形态，采用细胞划痕实验与Transwell细胞迁移法检测各组细胞的迁移与侵袭能力，采用免疫荧光技术、蛋白质印迹技术检测TGF-β/Smad信号通路下游关键蛋白Smad2与p-Smad2/3的表达情况。结果 14-3-3ζ过表达组梭形间充质样细胞数量多，细胞黏附能力下降，细胞间排列松散，且出现丝状伪足；中药血清组和TGF-β/Smad通路抑制剂组细胞间的连接较为紧密，伪足相对减少；14-3-3ζ过表达中药血清组和14-3-3ζ过表达TGF-β/Smad通路抑制剂组细胞间的细胞间的连接更紧密。14-3-3ζ过表达组的细胞迁移速率明显快于空白EMT组(P<0.05),细胞侵袭数量明显多于空白EMT组(P<0.05),Smad2、p-Smad2/3蛋白表达量明显高于空白EMT组(P<0.05);中药血清组、14-3-3ζ过表达中药血清组、TGF-β/Smad通路抑制剂组、14-3-3ζ过表达TGF-β/Smad通路抑制剂组细胞迁移速率明显慢于14-3-3ζ过表达组和空白EMT组(P均<0.05),细胞侵袭数量明显少于14-3-3ζ过表达组和空白EMT组(P均<0.05),Smad2、p-Smad2/3蛋白表达量明显低于14-3-3ζ过表达组和空白EMT组(P均<0.05)。结论 七方胃痛颗粒能抑制14-3-3ζ过表达AGS细胞上皮间质转化的侵袭、迁移能力，其抗癌作用的发挥很可能与抑制14-3-3ζ/TGF-β/Smad信号通路相关。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 广西中医药大学