摘要
目的探讨miR-30b对大鼠H9C2心肌细胞凋亡的影响。方法将大鼠H9C2细胞分为空白对照组、阴性对照组和miR-30b mimics三个组,按照LipofectamineineTM2000转染方法转染24 h,RTPCR检测三个组的miR-30b表达;将H9C2细胞分为阴性对照组、miR-30b mimics组和miR-30b mimics+H2O2组,24 h转染后并采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,以Western bloting法检测各组天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、β-连环蛋白(β-catenin)和c-myc蛋白表达。结果阴性对照组miR-30b的mRNA表达(1. 007±0. 062)与空白对照组(1. 000±0. 059)差异无统计学意义(F=0.200,P=0.849),而miR-30bmimics组miR-30b的mRNA表达(4.212±0.088)高于阴性对照组(F=72. 929,P=0. 000)和空白对照组(F=74. 261,P=0. 000)。阴性对照组、miR-30b mimics组和miR-30b mimics+H202组的细胞凋亡率分别为(11.35±0. 88)%、(1.22±0. 13)%和(5. 83±0.41)%,miR-30b mimics组、miR-30b mimics+H2O2组细胞凋亡率均低于阴性对照组(F=778. 088,P=0. 000,F=193. 976,P=0. 000),而miR-30b mimics组细胞凋亡率低于miR-30b mimics+H2O2组(F=689. 257,P=0. 000)。miR-30b mimics组和miR-30b mimics+H202组Cleaved caspase3(F=351. 384,P=0. 00,F=55. 762,P=0. 000)、β-catenin (F=506. 207,P=0. 000,P=248. 244,P=0. 000)和c-myc蛋白(F=456. 110,P=0. 000,F=115. 466,P=0. 000)表达均低于阴性对照组,而miR-30b mimics组Cleaved caspase3(F=167. 105,P=0. 000)、β-catenin(F=221, 693,P=0. 000)和c-myc(F=127. 825,P=0. 000)蛋白表达低于miR-30b mimics+H2O2组。结论过表达miR-30b可降低H9C2心肌细胞凋亡,其机制与下调Wnt信号通路有关。
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