摘要

背景:膝骨关节炎严重影响患者的正常生活,目前仍无最佳治疗方案。目的:评价人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠注射液治疗膝骨关节炎的有效性和安全性。方法:(1)细胞学实验观察人脐带间充质干细胞对淋巴细胞增殖和调节性T细胞比例的影响;(2)油红O染色、阿尔新蓝染色观察预混玻璃酸钠对人脐带间充质干细胞成脂和成软骨的影响;(3)对新西兰白兔行右膝前交叉韧带切断术和内侧半月板切除术造模,术后第6,9和12周关节内分别注射人脐带间充质干细胞、玻璃酸钠注射液、人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠注射液,术后第16周处死全部新西兰白兔,取心、肝、脾、肺、肾、脑、关节腔周围肌肉和膝关节,用qPCR方法检测人特异基因FOXP2表达;取股骨髁用于形态学、组织学和免疫组化分析。结果与结论:(1)人脐带间充质干细胞抑制T淋巴细胞增殖和上调调节性T细胞比例;(2)预混玻璃酸钠的人脐带间充质干细胞依然保持成脂和成软骨的能力;(3)术后第16周,新西兰白兔心、肝、脾、肺、肾、脑、关节腔周围肌肉和膝关节中人特异基因FOXP2全部为阴性;(4)人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠组大体观察关节面较平整光滑,ICRS评分较玻璃酸钠组显著升高;苏木精-伊红染色显示软骨厚度增加,Pineda评分明显低于玻璃酸钠组和人脐带间充质干细胞组;软骨全层含较多蛋白聚糖,OARSI评分明显低于玻璃酸钠组和人脐带间充质干细胞组;免疫组化显示关节软骨Ⅱ型胶原表达增加,基质金属蛋白酶13表达减少;(5)结果显示,人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠注射液在关节软骨修复方面优于单纯玻璃酸钠注射液或单纯人脐带间充质干细胞,且无明显不良反应。