脂多糖通过p38/MAPK通路对巨噬细胞自噬的调控作用

作者：杜涛; 江先汉; 陈慧; 赖义明; 张睿; 黄海

来源：中山大学学报(医学科学版), 2014, 35(06): 807-813.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2014.0134

• 脂多糖
• 自噬
• 巨噬细胞
• p38/MAPK

【目的】观察脂多糖(LPS)对巨噬细胞自噬的影响及p38/MAPK通路在其中的作用。【方法】体外培养巨噬细胞株RAW264.7,分为对照组、饥饿状态激活自噬组、单纯LPS刺激组、LPS+P38抑制剂(SB203582)组和LPS+m TOR抑制剂(rapamycin)组。将前期构建的载体pc DNA3.1-GFP-LC3,转染RAW264.7,通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况。q RT-PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的基因Atg5,Atg7,LC3-Ⅱ和Bnip3 m RNA表达水平的改变。利用Western blotting检测LC3-Ⅱ、p-P38、P38蛋白在各组中的表达情况,以评价LPS激活巨噬细胞自噬过程中p38/MAPK通路的作用。【结果】在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组、LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组有明显增强;q RT-PCR检测到自噬相关基因Atg5,Atg7,LC3-Ⅱ,和Bnip3 m RNA的表达在饥饿状态组、LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组有明显增强;Western blotting检测发现p-P38在饥饿状态组、LPS组和LPS+rapamycin组中表达明显升高;LC3-Ⅱ的表达在饥饿状态组、LPS+SB203582组和LPS+rapamycin组中表达要高于对照组和LPS组。【结论】LPS参与巨噬细胞自噬的调控,除经典m TOR通路之外,p38/MAPK通路是其抑制通路之一。

• 单位
  广州医学院; 中山大学孙逸仙纪念医院