大鼠骨形成蛋白4基因重组腺病毒的构建

作者：万小平; 李小荣; 谭辉; 何峰; 裴海平; 申竑; 李小刚

来源：中国现代医学杂志, 2006, (09): 1314-1316+1321.

• Cre-loxP特异性位点基因重组
• BMP4
• 基因重组腺病毒 Cre-lox P site-specific recombination
• BMP4
• recombinant adenovirus

目的利用Cre-loxP特异性位点基因重组技术构建大鼠骨形成蛋白BMP4的重组腺病毒。方法高保真PCR得到大鼠BMP4cDNA,克隆到质粒pCR-BluntII-TOPO中,然后将目的基因片段连接到中间载体质粒pDNR-CMV,测序后在Cre重组酶作用下,将BMP4cDNA转移到腺病毒载体pLP-Ade-no-X-CMV。在HEK293细胞中扩增重组腺病毒,并检测BMP4基因重组腺病毒在细胞中的表达和功能。结果PCR法和限制性内切酶XholI消化法均证实BMP4重组腺病毒的成功构建,RT-PCR和WesternBlot检测证实该重组腺病毒显著性增强了CFSC-2G细胞中BMP4的mRNA和蛋白...

• 单位
  中南大学湘雅医院; 中南大学; 中南大学湘雅三医院