促凋亡分子Noxa介导依托泊苷引起的神经母细胞瘤细胞死亡的实验研究

作者：詹玥; 张斯萌; 李志杰; 花中艳^*

来源：国际儿科学杂志, 2021, 48(04): 280-285.

• 儿童
• 神经母细胞瘤
• Noxa
• 依托泊苷

目的研究化疗药物依托泊苷是否通过促凋亡分子Noxa引起儿童神经母细胞瘤(neuroblastoma, NB)细胞的死亡。方法培养人NB TB3和TB8细胞, 分别给予不同浓度的依托泊苷(0, 0.125, 0.25, 0.5, 0.75, 1.0 mg/L)处理, 并利用CCK8检测细胞存活的变化情况;收集处理不同时间的TB3和TB8细胞, 提取RNA及蛋白, 定量PCR方法检测Noxa的mRNA水平表达, Western Blot方法检测Noxa的蛋白水平表达, 然后利用Noxa的siRNA转染细胞, 观察依托泊苷对细胞存活率的影响情况。结果经过浓度分别为0.125 mg/L、0.25 mg/L、0.5 mg/L、0.75 mg/L、1.0 mg/L的依托泊苷处理后, TB3细胞存活率分别为(73.13±8.45)%、(56.18±10.50)%、(33.90±4.17)%、(26.76±6.67)%、(13.49±0.58)%, 差异有显著统计学意义(P均<0.01);TB8细胞存活率分别为(71.06±6.96)%、(37.45±0.68)%、(25.53±3.70)%、(20.28±2.75)%、(10.09±2.52)%, 差异有显著统计学意义(P均<0.01)。依托泊苷处理的TB3和TB8细胞Noxa mRNA和蛋白质表达量明显升高, 并且表达趋势有时间依赖性;Noxa的siRNA转染细胞后, 能够降低Noxa在TB3和TB8细胞中的表达。依托泊苷浓度为0.5mg/L时, 转染对照siRNA、Noxa siRNA1、Noxa siRNA2的TB3细胞存活率分别为(45.12±13.58)%、(72.70±21.34)%、(52.08±20.36)% ;TB8细胞存活率分别为(35.52±0.38)%、(63.94±0.10)%、(50.27±1.62)%, 差异有显著统计学意义(P均<0.01)。依托泊苷浓度为1.0 mg/L时, 转染对照siRNA、Noxa siRNA1、Noxa siRNA2的TB3细胞存活率分别为(13.26±1.84)%、(51.08±2.41)%、(42.80±1.42)%, 差异有统计学意义(P均<0.05), TB8细胞存活率分别为(22.22±3.39)%、(58.00±11.37)%、(40.55±6.94)%, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Noxa介导化疗药物依托泊苷能引起NB TB3和TB8细胞死亡。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院