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摘要
背景:神经干细胞在神经损伤修复和退行性疾病中有广泛的应用前景,体外培养鉴定及促神经元诱导分化是后续研究的基础。目的:采用悬浮神经球培养法分离培养神经干细胞并对其鉴定,了解生物学特性。方法:采用悬浮神经球培养法从C57BL/6胎鼠大脑半球分离培养神经干细胞,观察形态特征及超微结构,CCK-8法绘制生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin的表达;用体积分数为1%和10%的血清诱导分化后,免疫荧光法检测GFAP、βⅢ-tubulin和MBP的表达。结果与结论:(1)体外培养得到悬浮生长的神经球,生长曲线和细胞周期表明细胞增殖力强;(2)透射电镜观察到神经干细胞核浆比高,呈未分化状态;(3)Nestin免疫荧光阳性;(4)不同体积分数的血清诱导后均可分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞,体积分数为1%血清能诱导分化得到更多的神经元细胞;(5)结果表明,采用悬浮神经球培养法成功分离培养得到了神经干细胞,低体积分数血清有利于神经干细胞向神经元分化。
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单位新桥医院
