肝纤维化相关细胞因子双重RNA干扰质粒的构建及转染肝星状细胞研究

作者：蒋玉凤; 周德江; 张建军; 黄飞; 史小玲

来源：实用肝脏病杂志, 2012, (06): 516-519.

• 肝纤维化
• RNA干扰
• 质粒载体
• 结缔组织生长因子
• 金属蛋白酶组织抑制因子-1
• 肝星状细胞 Hepatic fibrosis
• RNA interference
• Connective tissue growth factor
• Tissue inhibitor of metalloproteinase-1
• Hepatic stellate cell

目的构建以大鼠CTGF和TIMP-1基因为靶点的双重RNA干扰表达载体质粒,以检测其转染肝星状细胞的效率。方法筛选出对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计1对含有短发夹结构的RNA干扰靶点序列,分别克隆到质粒载体psiRNA-DUO-GFPzeo,构建含目的靶基因片段的重组质粒载体psiRNA-GFP-CT-GF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com(含有CTGF和TIMP-1),进行酶切和测序鉴定。将构建成功的重组质粒psiRNA-GFP-CTGF、psiRNA-GFP-TIMP-1和psiRNA-GFP-Com转染大鼠肝星状细胞,在荧光显微镜...

• 单位
  泸州医学院附属医院; 荆州市中心医院; 中国人民解放军成都军区总医院