单管多重荧光定量RT-PCR方法鉴别新甲型H1N1及甲型和乙型流行性感冒病毒

作者：张弘; 何永强; 张严峻; 王真; 李榛

来源：中华预防医学杂志, 2012, 46(03): 273-276.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2012.03.017

• 逆转录聚合酶链反应
• 流感病毒A型
• H1N1亚型
• 流感病毒B型 Reverse transcriptase polymerase chain reaction
• Influenza A virus
• HlNl subtype
• Influenza B virus

目的建立和评价鉴别新甲型H1N1、甲型和乙型流行性感冒(简称流感)病毒的单管多重荧光定量RT-PCR方法。方法 2010年10月至2011年4月,采集流感样患者咽拭子样本213份。分别选用新甲型H1N1流感病毒HA基因、甲型流感病毒M基因和乙型流感病毒NP基因中的152、128和107 bp片段作为荧光定量PCR检测的靶片段,设计特异性引物和不同发光基团标记的TaqMan探针,采用体外转录构建标准品,绘制标准曲线,评价检测方法的重复性、特异度和灵敏度,并对213份流感样患者咽拭子样本进行检测及测序验证。结果 3种病毒对应的标准曲线分别为:新甲型H1N1流感病毒:γ=-3.46lgX+46.98...

• 单位
  浙江中医药大学; 浙江出入境检验检疫局; 浙江省疾病预防控制中心