摘要
目的 探讨三七皂苷R1对碘美普尔400诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响及其调控机制。方法 NRK-52E细胞分为5组:正常对照组正常培养;三七皂苷组加入三七皂苷R1培养;碘美普尔组加入碘美普尔400培养;三七皂苷+碘美普尔组先加入三七皂苷R1培养,然后加入碘美普尔400培养;锌原卟啉组先加入锌原卟啉和三七皂苷R1培养,然后加入碘美普尔400培养。CCK-8法评估细胞活力筛选三七皂苷R1最佳保护浓度,乳酸脱氢酶(LDH)法检测各组(除锌原卟啉组外)细胞损伤程度,细胞划痕法检测正常对照组、碘美普尔组、三七皂苷+碘美普尔组细胞愈合率,酶标仪检测各组(除锌原卟啉组外)细胞中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)]含量,ELISA法检测各组(除锌原卟啉组外)细胞中炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量,流式细胞术检测正常对照组、碘美普尔组、三七皂苷+碘美普尔组细胞凋亡率,RT-qPCR法检测各组细胞中核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达情况,ELISA法检测各组细胞中HO-1蛋白含量,免疫荧光检测细胞中Nrf2蛋白表达情况。结果 细胞活力筛选,25μmol/L三七皂苷R1预处理24 h作为最优三七皂苷R1用药条件。与正常对照组比较,碘美普尔组细胞愈合率、细胞中SOD含量、细胞中HO-1 mRNA表达量及HO-1蛋白含量、Nrf2 mRNA表达量及Nrf2免疫荧光强度均明显降低(P均<0.05),LDH含量、MDA和ROS含量、IL-6和TNF-α含量、细胞凋亡率均明显升高(P均<0.05)。与碘美普尔组比较,三七皂苷+碘美普尔组的细胞活力、细胞愈合率、细胞中SOD含量、细胞中HO-1 mRNA表达量及HO-1蛋白含量、Nrf2 mRNA表达量及Nrf2免疫荧光强度均明显升高(P均<0.05),LDH含量、MDA和ROS含量、IL-6和TNF-α含量、细胞凋亡率均明显降低(P均<0.05);与三七皂苷+碘美普尔组比较,锌原卟啉组中Nrf2和HO-1mRNA表达量、HO-1蛋白含量均明显降低(P均<0.05)。结论 三七皂苷R1可通过激活Nrf2/HO-1途径减轻碘美普尔400诱导的NRK-52E细胞损伤。
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