摘要
为了快速检测危害无花果的病毒种类,本研究建立了一种同时检测3种危害无花果的病毒的多重RT-PCR检测体系,包括无花果斑点相关病毒(FFkaV)、无花果叶斑相关病毒(FLMaV)和无花果花叶病毒(FMV)。根据三种病毒基因保守区域设计特异性引物,分别对cDNA用量、dNTPs用量、Easy pfu DNA聚合酶用量、MgSO_(4)用量、退火温度和引物组合进行优化,并利用RT-PCR进行验证。结果显示,总体积为25 μL的反应体系中Easy pfu DNA聚合酶(2.5 U/μL)用量0.7 μL、cDNA用量1.0 μL、dNTPs (2.5 mmol/L)用量2.5 μL、MgSO_(4 )...
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单位新疆农业大学; 中国农业科学院烟草研究所; 中国农业科学院植物保护研究所; 新疆林业科学院; 植物病虫害生物学国家重点实验室