三种无花果病毒的多重RT-PCR检测

作者:吐逊艾力·艾孜提力; 侯婉莹; 郭庆元; 古丽尼沙·卡斯木; 代毅; 李世访; 麦合木提江·米吉提
来源:分子植物育种, 2020, 1-13.

摘要

为了快速检测危害无花果的病毒种类,本研究建立了一种同时检测3种危害无花果的病毒的多重RT-PCR检测体系,包括无花果斑点相关病毒(FFkaV)、无花果叶斑相关病毒(FLMaV)和无花果花叶病毒(FMV)。根据三种病毒基因保守区域设计特异性引物,分别对cDNA用量、dNTPs用量、Easy pfu DNA聚合酶用量、MgSO_(4)用量、退火温度和引物组合进行优化,并利用RT-PCR进行验证。结果显示,总体积为25 μL的反应体系中Easy pfu DNA聚合酶(2.5 U/μL)用量0.7 μL、cDNA用量1.0 μL、dNTPs (2.5 mmol/L)用量2.5 μL、MgSO_(4 )...