A20在胆管结扎所致肝纤维化小鼠中的表达及作用机制研究

作者：王晓晗; 韩丰; 沈亮; 陈云清; 沈月玉; 高晨; 侯震涛; 冀子中; 范竹萍

来源：国际消化病杂志, 2021, 41(04): 303-307.

• A20
• 胆管结扎
• 肝纤维化
• 炎性反应

目的研究胆管结扎(BDL)所致肝纤维化模型小鼠肝脏中A20及炎性因子的表达情况,在细胞水平探讨A20的作用机制。方法建立BDL所致小鼠肝纤维化模型,BDL组结扎胆管后关腹,对照组不结扎胆管直接关腹,10 d后处死小鼠,留取肝脏行H-E染色并观察。应用蛋白质印迹法(Western blotting)检测两组小鼠肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及A20蛋白的表达。应用实时荧光PCR法(Real-time PCR)检测两组小鼠肝脏中炎性反应相关指标mRNA的表达。在体外使用脂多糖(LPS)处理人肝星状细胞(HSC)LX-2细胞,观察A20及炎性反应信号通路因子的变化。结果 BDL组小鼠肝脏组织H-E染色显示肝细胞片状坏死,大胆管增生,肝纤维化明显。BDL组小鼠肝脏中α-SMA蛋白表达为对照组的2.11倍(P<0.05),A20蛋白表达为对照组的2.47倍(P<0.01)。BDL组小鼠肝脏中转化生长因子-β(TGF-β)、IL-6、IL-1β、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA相对表达量较对照组明显升高,分别为对照组的1.94倍、5.50倍、2.47倍、37.59倍、4.50倍(P=0.032 8、P=0.001 0、P=0.004 6、P<0.000 1、P=0.014 6)。使用LPS(0.1μg/L)处理LX-2细胞(0、5、10、15、30、60 min),NF-κB抑制因子α(IκBα)、磷酸化IκBα蛋白的表达水平在处理15 min时到达高峰,随后开始下降;A20蛋白的表达水平在处理30 min时开始逐渐上升。结论 A20可能参与了BDL所致肝纤维化模型小鼠的炎性反应,在LX-2细胞内的炎性反应通路中发挥负向调节作用,但A20在炎性反应通路中的具体作用机制有待进一步研究。

• 单位
  上海交通大学医学院附属仁济医院; 嘉兴学院