摘要
目的 探讨311 nm中波紫外线通过Rho家族小GTP酶对B16小鼠黑素瘤细胞树突生成的影响.方法 用相差显微镜和激光共聚焦显微镜分别观察311 nm中波紫外线照射后对B16黑素瘤细胞的树突变化和细胞骨架蛋白F-肌动蛋白的影响;用Pull down方法检测311 nm中波紫外线照射前及照射后不同时间点(15、30、60和120 min)B16黑素瘤细胞GTP-RhoA和GTP-Racl蛋白的表达情况.结果 311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射后24 h,B16黑素瘤细胞呈现胞体增大近似球状,树突明显增多似树枝,与未照光细胞比较树突数量明显增多(P<0.01);而未照光细胞的树突仅表现为双极或三极,细胞分叉不明显.激光共聚焦显微镜显示,311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射前,B16黑素瘤细胞内张力纤维纹理清晰,照射后30 min和60 min细胞内张力纤维解聚、断裂,纹理欠清晰,在照射后6 h时张力纤维纹理模糊,呈团块状.Pull down结果显示,311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射后15 min和30 min,B16黑素瘤细胞GTP-Racl蛋白的表达逐渐升高,在30 min时表达是照射前的2倍多,随后略有下降,但在照射后60 min和120 min时表达仍高于对照组;而GTP-RhoA蛋白在照射后略有下降,而后逐渐升高,在照射后120 min时升高到照射前的1.6倍.结论 311 nm中波紫外线可通过活化Racl促B16黑素瘤细胞树突生成.
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