抗人类表皮生长因子受体2/表皮生长因子受体双特异性抗体对人胰腺癌细胞PANC-1的靶向治疗

作者：黄长山; 余伟; 王谦; 丁月超; 马超; 黄涛; 张浩^*

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(08): 1330-1332.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.08.021

• 人类表皮生长因子受体2
• 表皮生长因子受体
• 胰腺癌
• 双特异性抗体

目的通过同时靶向人类表皮生长因子受体-2(Her-2)和表皮生长因子受体(EGFR)分子的双特异性抗体抑制人胰腺癌细胞PANC-1体内外增殖。方法通过基因合成获得曲妥珠单抗和西妥昔单抗的基因序列, 经重叠聚合酶链反应(PCR)融合成目的基因, 构建入表达载体, 转化进毕赤酵母X-33进行表达, 获得同时靶向Her-2和EGFR的双特异性抗体CT-BiAb;流式检测CT-BiAb对胰腺癌细胞系PANC-1的结合能力;MTT法检测CT-BiAb对PANC-1细胞的增殖抑制;通过流式双染法检测给药后PANC-1细胞的凋亡率;建立PANC-1荷瘤小鼠动物模型, 检测CT-BiAb的体内抗肿瘤活性。结果通过毕赤酵母表达及纯化, 获得CT-BiAb, 经Western blot鉴定验证了CT-BiAb表达及装配正确。流式细胞术检测CT-BiAb与PANC-1的结合率为50.9%。细胞增殖抑制实验, 与PBS组相比, 亲本抗体组与CT-BiAb组对PANC-1均有抑制作用, 且抑制作用呈浓度依赖性。凋亡实验, CT-BiAb组PANC-1细胞凋亡率[(33.50±7.14)%]高于亲本曲妥珠单抗[(15.86±4.32)%, P=0.022], 也高于西妥昔单抗组[(18.64±5.71)%, P=0.048]。移植瘤模型实验, CT-BiAb高剂量组肿瘤抑制率可以达到(73.76±10.21)%, 明显优于亲本曲妥珠单抗[(32.55±14.42)%, P=0.001], 也明显优于西妥昔单抗组[(52.63±8.47)%, P=0.006]。结论本文构建了CT-BiAb, 其具有良好的体内外抗肿瘤活性, 有效地抑制PANC-1的体内外增殖, 为抗肿瘤治疗提供了新的思路。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 河南省肿瘤医院; 郑州大学